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透析袋夾的使用小技巧分享
點擊次數:3115 更新時間:2019-03-18
透析袋夾只需要使用的半透膜即可完成。透析袋夾通常是將半透膜制成袋狀,將生物大分子樣品溶液置入袋內,將此透析袋浸入水或緩沖液中,透析袋內樣品溶液中的大分子量的生物大分子被截留在袋內,而鹽和小分子物質不斷擴散透析到透析袋外,直到透析袋內外兩邊的濃度達到平衡為止。保留在透析袋內未透析出的樣品溶液稱為"保留液",透析袋(膜)外的溶液稱為"滲出液"或"透析液"。透析袋透析的動力是擴散壓,擴散壓是由橫跨膜兩邊的濃度梯度形成的。透析袋夾透析的速度反比于膜的厚度,正比于欲透析的小分子溶質在膜內外兩邊的濃度梯度,還正比于膜的面積和溫度,通常是4℃透析,升高溫度可加快透析速度。透析袋夾的處理:可先用50%乙醇煮沸1小時,再依次用50%乙醇、0.01 mol/L碳酸氫鈉和0.001 mol/L EDTA溶液洗滌,后用蒸餾水沖洗即可使用。實驗證明,50%乙醇處理對除去具有紫外吸收的雜質特別有效。(也可先在大體積的2%(W/V)碳酸氫鈉和1mmol/L EDTA(pH 8.0)中將透析袋煮沸10分鐘,用蒸餾水*清洗后,再放在1mmol/L EDTA(pH 8.0)中將之煮沸10分鐘。)使用后的透析袋洗凈后可存于4℃蒸餾水中,確保透析袋夾始終浸沒在溶液內。若長時間不用,可加少量NaN2,以防長菌。從此時起取用透析袋必須戴手套。洗凈涼干的透析袋彎折時易裂口,用時必須仔細檢查,不漏時方可重復使用。
透析袋夾使用方法:
1.使用時,一端用橡皮筋或線繩扎緊,也可以使用特制的透析袋夾夾緊,由另一端灌滿水,用手指稍加壓,檢查不漏,方可裝入待透析液。
2.通常要留1/3~1/2的空間,以防透析過程中,透析的小分子量較大時,袋外的水和緩沖液過量進入袋內將袋漲破。
3.為了加快透析速度,除多次更換透析液外,還可使用磁子攪拌。
4.透析的容器要大一些,可以使用大燒杯、大量筒和塑料桶。小量體積溶液的透析,可在袋內放一截兩頭燒圓的玻璃棒或兩端封口的玻璃管,以使透析袋沉入液面以下。
5.檢查透析效果的方法是:用1%BaCl2檢查(NH4)2SO4,用1%AgNO3檢查NaCl、KCl等。
保存條件:冷卻或使用后,將洗干凈的透析袋夾存放于4度,必須確保透析袋始終浸沒在蒸餾水或溶液中。若長時間不用,可加少量NaN2,以防長菌。從此時起取用透析袋必須戴手套。